期刊简介

《中华老年医学杂志》1982年创刊,现为月刊。本刊为中国科学技术协会主管、中华医学会主办的面向国内外发行的老年医学专业领域科技核心(统计源)期刊。办刊宗旨是贯彻党和国家的卫生工作方针政策,注重理论和实践、普及与提高相结合,与时俱进地反映我国老年医学临床与科研工作的最新进展,促进国内外老年医学的交流与发展,为老年医疗及其学术架起快捷、高效的桥梁。

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  • 杂志名称:中华老年医学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0254-9026
  • 国内刊号:11-2225/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:1996年全国科技期刊评比中,被评为中国科协优秀期刊期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏
中华老年医学杂志2015年第06期

降钙素相关肽对骨髓间充质干细胞生物学特征影响的实验研究

龙仙萍;陈攀科;崔璨;汪松;石蓓;姚小剑

关键词:间质干细胞, 降钙素基因相关肽, 转染, 细胞学技术
摘要:目的 观察携带降钙素基因相关肽(CGRP)的慢病毒对细胞生存和分化的影响. 方法 培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),携带CGRP的慢病毒载体转染MSCs(MSCsCGRP++组),空病毒载体转染MSCs作为对照组;应用流式细胞仪检测病毒转染率,酶联免疫吸附(ELISA)法测定CGRP蛋白表达,应用流式细胞仪及细胞免疫组化检测细胞表面标记物,胎盘蓝染色观察细胞存活能力,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况. 结果 携带CGRP的慢病毒转染MSCs后1d,荧光显微镜未观察到细胞有荧光,但ELISA测定MSCsCGRP+ +组有少量CGRP表达,随着转染时间延长,细胞逐渐出现荧光,慢病毒转染MSCs后3d和4d,镜下可见强荧光表达,细胞转染率分别为(77.87%和79.58%),ELISA检测MSCsCGRP++组CGRP表达量较对照组[(19.53±0.50) pg/ml和(3.12±0.001) pg/ml]增加(t=48.964,P<0.01).慢病毒转染MSCs后3d,流式细胞仪检测MSCs仍高表达CD29和CD90,CD31的表达为24.75%,细胞转染后7d,CD31的表达为20.72%,与对照组6.63%比较CD31表达增加,vWF表达也随着转染时间延长表达逐渐增加;细胞转染后3d,MSCsCGRP+/+组及对照组均未见α-SMA表达,细胞转染14 d,在MSCsCGRP++组α SMA染色仍阴性,对照组胞浆见α-SMA阳性表达;细胞转染后3d和7d,MTT及台盼蓝染色结果显示两组间细胞活力及存活情况均无差异性(3d细胞活力t=-0.253,3d细胞存活率t=-0.307,7d细胞活力t=0.290,7d细胞存活率t=-0.690,均P>0.05),β半乳糖苷酶检测细胞衰老程度在两组间差异也无统计学意义(3 d t=0.167,7 dt=0.141,均P>0.05),随着转染时间延长,细胞转染14d,MSCsCGRP++组衰老程度较对照组降低(t=2.446,P<0.05). 结论 转染慢病毒后细胞生物活性无明显影响,细胞仍具有增殖分化能力,细胞转染分泌的CGRP能促进细胞向内皮分化,抑制细胞向平滑肌细胞分化,这为基因工程细胞疗法治疗血管增殖性疾病提供新的思路和理论及实验依据.